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Taq DNA Ligase

  • Cat.No.ON-069
  • Cas.No.
  • 来源重组大肠杆菌
  • 纯度>95% by SDS-PAGE
  • 储存条件-20℃
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产品描述:Taq DNA ligase可催化双链DNA中相邻的5'-磷酸基和3'-羟基形成磷酸二酯键。NAD+是这个酶的辅助因子。

来源:重组大肠杆菌

规格:40U/μL

活性单位定义:1 单位指在50 μL反应体系中,45℃ 反应条件下,15分钟能使 50% 的12 bp粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12 bp粘性末端来自于经1 μg BstEII消化后的λDNA。

酶存储缓冲液:10mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 0.1% Triton X-100 and 50% (v/v)Glyercol.

配套溶液:10X Taq DNA Ligase Reaction Buffer, Cat#ON-72, 200mM Tris-HCl pH7.6, 25℃, 250mM KAC, 100mM Mg(AC)2, 10mM NAD+, 0.1% Triton X-100.


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注:该酶需NAD+作为辅助因子,在10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中已添加NAD+,为了延长NAD+的半衰期,应保存于-70℃.该酶在45℃-65℃范围内均有活性。

推荐的操作步骤:

1. 准备一个无污染的PCR管,按照下表加入试剂:   

ComponentAmount
Nuclease-free H2Oto 50μL
DNAup to 1μg of DNA
10×Taq DNA ligase reaction buffer5μL
Taq DNA ligase2μL (80 units)

2. 45°C反应 15 min.

储藏温度:-20℃

质控检测:无DNase、Nickase污染

纯度:SDS-PAGE纯度:大于95%

1. Barany F. Proc Nat Acad Sci USA. 88, 189–193 (1991).

2. Gail Lauer, Edwin A. Rudd, Dianel L. Mckay, et al. Journal Of Bacteriology. 173, 5047-5053(1991).


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