产品描述：T4 DNA ligase能够催化双链DNA或RNA中的5'-磷酸和3'-OH发生反应，形成磷酸二酯键。T4 DNA ligase还能够修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交链中单链的缺口，可以连接粘末端，也可以连接平末端，反应时需要ATP的参与。
来源：重组大肠杆菌
规格：400U/μL
活性单位定义：1单位活性定义为16℃、30分钟内，连接50% 6μg λ-HindIII DNA 所需的酶量。
酶存储缓冲液：10mM Tris-HCl (pH7.4, 25℃), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, and 50% (v/v)Glyercol.
配套溶液：10X T4 DNA Ligase Reaction Buffer, Cat#ON-158, 500mM Tris-HCl pH7.5, 25℃, 100mM MgCl2, 10mM ATP, 100mM DTT
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1. 文献报道连接条件的多样性。平末端连接通常连接的适宜温度是15-20℃，时间是4-18h，而粘末端连接的适宜条件是室温（22℃）3hr或者4-8℃过夜。
2. 由于PEG质量的多样性，在连接反应中不推荐使用PEG。另外，克隆时使用PEG可能会带来环化，并且残留的PEG会抑制后续反应。
3. 连接反应需要控制质粒与插入片段的比例为1:3，以5kb质粒和1kb插入DNA为例完成下列连接反应：
| Component | Amount |
| Nuclease-free H2O | to 20μL |
| Vector DNA | 100ng |
| Insert DNA | 60ng |
| 10×T4 DNA ligase reaction buffer | 2μL |
| T4 DNA ligase | 1μL |
室温反应3h或者4℃过夜或者16℃ 4-18h。
储藏温度：-20℃
质控检测：无DNase、Nickase、RNase污染
纯度：SDS-PAGE纯度：大于95%
1. Rossella Rossi, Alessandra Montecucco, et al. Nucleic Acids Research. 25, 2106–2113 (1997).
2. Xinxin Liu, Anliang Huang, et al. Protein Expression and Purification. 109, 79-84(2015).